摘要 [目的] 建立石墨爐原子吸收光度法直接測(cè)定尿鉛的方法。[方法] 比較了二氯化鈀、硝酸鎂-磷酸二氫銨分別作基體改進(jìn)劑的不同效果；測(cè)定了尿樣不同稀釋比例對(duì)結(jié)果的影響；試驗(yàn)出了*升溫程序。[結(jié)果]尿樣經(jīng)1：1稀釋后，加入5μl濃度為100mg/l二氯化鈀溶液作基體改進(jìn)劑，采用橫向加熱石墨管、縱向交變?nèi)尘靶Ｕ苯舆M(jìn)樣法測(cè)定鉛作業(yè)工人尿中鉛，可有效地扣除背景干擾，用標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法即可定量。方法線(xiàn)性范圍0~100μg/l ，相關(guān)系數(shù)r=0.9998，檢出限2.98µg/l，三種濃度樣品加標(biāo)回收率為92.0~105.5%，RSD為1.41~8.49%.

1.       材料與方法

1.1   儀器 

PE公司AA800型原子吸收分光光度儀，Lumina鉛空心陰極燈， PE公司TGHA型石墨管， AS800型自動(dòng)進(jìn)樣器

1.2 試劑 

1.00mg/ml鉛標(biāo)準(zhǔn)貯備液（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中心） 臨用時(shí)用0.5%HNO₃稀釋成50μg/l、100μg/l的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液。 100mg/l二氯化鈀溶液（1%硝酸介質(zhì)），重蒸餾優(yōu)級(jí)純硝酸

1.3 儀器條件

燈電流15mA，波長(zhǎng)283.3nm，狹縫0.7nm，載氣流量250ml/min，原子化階段停氣，進(jìn)樣體積10μl。石墨爐升溫程序：干燥溫度110⁰C，斜坡升溫5s，保持20s；干燥溫度130⁰C，斜坡升溫1s，保持20s；灰化溫度1000⁰C，斜坡升溫5s，保持20s；原子化溫度2100⁰C，斜坡升溫0s，保持5s；凈化溫度2450⁰C，斜坡升溫1s，保持3s。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

用0.5%HNO₃溶液配制含鉛50μg/l、100μg/l的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液，以0.5%HNO₃為稀釋液，用儀器自動(dòng)稀釋功能作鉛濃度為10、20、40、80、100μg/l標(biāo)準(zhǔn)系列。結(jié)果鉛濃度在0~100μg/l范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r=0.9998.

1.5 樣品處理 

取5.0ml尿樣于10ml比色管中，用1%HNO₃稀釋至10.0ml刻度，混勻。用自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣10μl。編輯方法時(shí)應(yīng)用儀器在線(xiàn)稀釋功能，當(dāng)樣品中鉛濃度超出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍110%時(shí)，設(shè)置在線(xiàn)自動(dòng)稀釋?zhuān)敝料♂尯蟮臏y(cè)試液濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍內(nèi)。

2．結(jié)果與討論

2.1 干燥溫度 

干燥溫度、干燥時(shí)間的選擇與樣品粘滯性、基體組成、進(jìn)樣量等因素有關(guān)。本試驗(yàn)樣品和基體改進(jìn)劑總體積為15μl，由于尿樣基體復(fù)雜，若采用一步干燥或干燥時(shí)間太短，在原子化階段可聽(tīng)到瀑濺的聲音，且信號(hào)明顯偏低。通過(guò)試驗(yàn)，本實(shí)驗(yàn)采用兩步干燥，*步110⁰C，斜坡時(shí)間稍長(zhǎng)為5s，保持20s，第二步干燥溫度為130⁰C，斜坡升溫1s，保持20s。

2.2基體改進(jìn)劑的選擇　

尿樣中含有大量的有機(jī)物質(zhì)和無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，可產(chǎn)生嚴(yán)重的背景吸收干擾。所選擇的基體改進(jìn)劑要能與鉛形成合金，極大地提高灰化溫度和原子化溫度，有效地去除基體干擾，又不會(huì)造成鉛的損失。本試驗(yàn)比較了二氯化鈀和硝酸鎂-磷酸二氫銨混合溶液分別作基體改進(jìn)劑，用灰化溫度、尿樣稀釋比例與樣品加標(biāo)回收率之間的關(guān)系進(jìn)行描述，結(jié)果見(jiàn)圖1、2。

從圖1可知，采用二氯化鈀為基體改進(jìn)劑時(shí)，灰化溫度zui高可達(dá)1000⁰C，對(duì)含50%尿測(cè)試液樣品加標(biāo)回收率達(dá)100.2%。采用硝酸鎂-磷酸二氫銨混合溶液為基體改進(jìn)劑時(shí)，灰化溫度為700⁰C，而對(duì)含50%尿測(cè)試液樣品加標(biāo)回收率則下降到61.6%。灰化溫度過(guò)高或過(guò)低樣品加標(biāo)回收率均會(huì)降低。

從圖2可知，對(duì)于尿樣，采用二氯化鈀時(shí)，測(cè)試樣中尿樣的比例達(dá)50%，樣品加標(biāo)回收率為100.2%。而采用硝酸鎂-磷酸二氫銨混合溶液時(shí)，測(cè)試樣中尿樣的比例為20%時(shí)，樣品加標(biāo)回收率為90.6%；當(dāng)測(cè)試樣中尿樣的比例增加至50%時(shí)，樣品加標(biāo)回收率降低至61.2%。

綜合考慮圖1、圖2結(jié)果，為了在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中盡可能減少樣品稀釋倍數(shù)，從而減少測(cè)定誤差，本試驗(yàn)選用加入100mg/l二氯化鈀溶液5μl作為基體改進(jìn)劑。

2.3灰化溫度和時(shí)間

   灰化溫度的選擇既要有利于灰化*和降低背景吸收，又要盡可能保證被測(cè)元素不受損失?？赏ㄟ^(guò)測(cè)繪灰化溫度-吸光度、背景值曲線(xiàn)來(lái)確定*灰化溫度，試驗(yàn)結(jié)果如圖3。從圖3可知，當(dāng)灰化溫度大于1000⁰C時(shí)，原子吸收及背景開(kāi)始出現(xiàn)平臺(tái)，背景吸收明顯降低。為了盡可能延長(zhǎng)石墨管使用壽命和保證被測(cè)元素不受損失，本方法選擇1000⁰C、斜坡升溫5s，保持20s進(jìn)行灰化。

2.4原子化溫度和時(shí)間

   通過(guò)測(cè)繪原子化溫度曲線(xiàn)即原子吸收吸光度隨原子化溫度的變化曲線(xiàn)來(lái)確定，結(jié)果見(jiàn)圖4。從圖4可知， 2100⁰C為*原子化溫度。從原子吸收信號(hào)峰也可看出，低于2100⁰C易產(chǎn)生雙峰或拖尾。原子化時(shí)間是使原子吸收信號(hào)在原子化階段回到基線(xiàn)，經(jīng)試驗(yàn)，當(dāng)原子化溫度為2100⁰C時(shí)，吸收信號(hào)回到基線(xiàn)的時(shí)間為3s，本試驗(yàn)選擇原子化時(shí)間為5s。

2.5 二氯化鈀加入量

   基體改進(jìn)劑二氯化鈀的加入量必須能*將被測(cè)成份合金化。通過(guò)測(cè)繪基體改進(jìn)劑-吸收信號(hào)曲線(xiàn)，如圖5。結(jié)果加入100mg/l二氯化鈀溶液5μl即能得到*吸收信號(hào)。

2.6尿樣稀釋比例的選擇

   于不同稀釋比例的尿樣中加入鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液使?jié)舛葹?0μg/l，按選定條件進(jìn)行測(cè)定。以回收率、稀釋倍數(shù)zui小的測(cè)試液為尿樣稀釋比例，結(jié)果當(dāng)尿樣作1：1稀釋時(shí)加標(biāo)回收率可達(dá)100.3%，故本試驗(yàn)采用將尿樣作1：1稀釋作測(cè)試液。

2.7準(zhǔn)確度和精密度

   于樣品測(cè)試液中加入相當(dāng)于濃度為10、40、80μg/l的鉛標(biāo)準(zhǔn)，按選定條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1   樣品加標(biāo)回收率、精密度試驗(yàn)表

2.8檢出限

 以連續(xù)20次測(cè)定試劑空白響應(yīng)值的3倍標(biāo)準(zhǔn)差，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)回歸方程計(jì)算方法檢出限為2.98μg/l.

3．結(jié)語(yǔ)

尿樣基體復(fù)雜，其所含的大量無(wú)機(jī)鹽類(lèi)及有機(jī)成份均可產(chǎn)生嚴(yán)重的背景吸收干擾測(cè)定，尤其是無(wú)機(jī)鹽類(lèi)，需要較高的灰化溫度方能除去。本法通過(guò)加入足夠的二氯化鈀作基體改進(jìn)劑，極大地提高灰化溫度及原子化溫度，將大部分干擾成份經(jīng)灰化去除。將尿樣作1：1稀釋?zhuān)M(jìn)樣量采用10μl，使樣品的背景吸收信號(hào)進(jìn)一步降低。儀器采用縱向交變?nèi)尘靶Ｕ夹g(shù)能有效地扣除背景吸收，使石墨爐原子吸收光度法直接測(cè)定尿鉛結(jié)果令人滿(mǎn)意。

 

參考文獻(xiàn)

[1]孫漢文，原子吸收光譜分析技術(shù).中國(guó)科學(xué)技術(shù)出版社,1992年.

[2]衛(wèi)生理化檢驗(yàn)文集（內(nèi)部資歷料）.成都市衛(wèi)生防疫站,2000年.